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UV1901PC紫外可見分光光度計(jì)的測(cè)量原理

UV1901PC紫外可見分光光度計(jì)的測(cè)量原理是依據(jù)物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)的單色輻射光可以產(chǎn)生特征吸收峰，特征吸收峰的吸光度符合郎伯- 比爾定律，可利用特征吸收峰和郎伯- 比爾定律對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。

UV1901PC紫外可見分光光度計(jì)因選擇性好、操作方便、濃度適用范圍寬和靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)被廣泛的應(yīng)用在制藥、冶金、化工、食品、醫(yī)學(xué)、地質(zhì)和環(huán)境檢測(cè)等領(lǐng)域。

紫外可見分光光度計(jì)系統(tǒng)組成基本相同，均由氘燈和鎢燈作為光源系統(tǒng)，然后經(jīng)過光棱鏡或光柵濾光，接著通過樣品吸收池吸收，zui后被光檢測(cè)器接收和檢測(cè)。為了對(duì)UV1901PC紫外可見分光光度計(jì)的測(cè)量誤差進(jìn)行控制，必需要對(duì)其誤差產(chǎn)生的來源進(jìn)行分析

紫外可見分光光度計(jì)測(cè)量誤差來源分析

波長(zhǎng)準(zhǔn)確度是紫外- 可見分光光度計(jì)zui重要的計(jì)量指標(biāo)，波長(zhǎng)準(zhǔn)確度是指指示波長(zhǎng)與實(shí)際波長(zhǎng)的符合程度，因此波長(zhǎng)的示值誤差直接影響紫外- 可見分光光度計(jì)測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性。按照JJG178-2007《紫外 、可見、近紅外分光光度計(jì)檢定規(guī)程》要求，可以使用定值的氧化

鈥、鐠釹、鐠鉺或者干涉濾光片進(jìn)行檢定，還可使用氧化鈥標(biāo)準(zhǔn)溶液和分析純1,2,4- 三氯苯對(duì)波長(zhǎng)進(jìn)行檢定。不帶自動(dòng)掃描功能的儀器，需對(duì)檢定點(diǎn)使用空氣作為空白進(jìn)行100% 和0% 透射比的調(diào)節(jié)，然后將濾光片或標(biāo)準(zhǔn)溶液放入樣品室進(jìn)行測(cè)量，從同一方向逐點(diǎn)測(cè)量不同波長(zhǎng)的透射比，直到找出吸光度峰值或者透射比谷值。

UV1901PC紫外可見分光光度計(jì)帶自動(dòng)掃描功能的儀器需先設(shè)定波長(zhǎng)范圍并進(jìn)行基線掃描，接著對(duì)濾光片或標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行掃描，波長(zhǎng)的示值誤差應(yīng)小于規(guī)程規(guī)定。UV1901PC紫外可見分光光度計(jì)的理論依據(jù)是郎伯- 比爾定律，郎伯- 比爾定律只有在采用單一波長(zhǎng)時(shí)才能成立，雜散光是指投射到光檢測(cè)器上與設(shè)定波長(zhǎng)不同的光的總和。雜散光引入的測(cè)量誤差與雜散光的數(shù)值基本一致，例如：如果一臺(tái)儀器的雜散光為1%，則雜散光引入的測(cè)量誤差也近似等于1%。雜散光產(chǎn)生的主要原因?yàn)椋?/span>

（1）灰塵、水珠或者霉斑污染光學(xué)元件；（2）光學(xué)元件位置發(fā)生變化或者損壞；（3）漏光導(dǎo)致復(fù)合光的混入。被測(cè)樣品的吸光度與透射比呈負(fù)對(duì)數(shù)的關(guān)系，即A=-logT，因此透射比的誤差大小直接影響測(cè)量數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。按照JJG178-2007《紫外 、可見、近紅外分光光度計(jì)檢定規(guī)程》透射比可以使用紫外透射比標(biāo)準(zhǔn)溶液、紫外透射比標(biāo)準(zhǔn)濾光片和光譜中性濾光片進(jìn)行檢定。導(dǎo)致透射比示值超差的原因通常有：波長(zhǎng)示值誤差超差、比色皿架盤偏斜、光門密閉不嚴(yán)、光譜帶寬發(fā)生變化、光電線性不足和比色皿配套性超差等因素。

基線平直度也是紫外- 可見分光光度計(jì)的主要技術(shù)指標(biāo)，基線平直度與噪聲和漂移的區(qū)別是：噪聲是指儀器在250nm 和500nm 處的光度噪聲，漂移是指儀器在500nm 處與時(shí)間相關(guān)的光度變化量，基線平直度是指儀器全波段的每個(gè)波長(zhǎng)點(diǎn)的光度噪聲，因此噪聲、漂移和

基線平直度三者結(jié)合才能反應(yīng)出儀器的綜合性能?；€平直度超差會(huì)造成圖譜掃描變形甚至偽峰的出現(xiàn)，因此會(huì)造成較大的測(cè)量誤差。

紫外可見分光光度計(jì)測(cè)量誤差超差的調(diào)修

波長(zhǎng)示值誤差超差的調(diào)修

如果紫外可見分光光度計(jì)的波長(zhǎng)示值誤差超出規(guī)程規(guī)定的范圍必須進(jìn)行調(diào)修，調(diào)修后再次經(jīng)檢定合格后方能使用。常見的波長(zhǎng)示值誤差超差的情況可以分為兩種：線性誤差。線性誤差的特點(diǎn)是儀器三個(gè)波長(zhǎng)段的波長(zhǎng)誤差偏向同一方向且數(shù)值相近。調(diào)修方法為：首先將波長(zhǎng)調(diào)節(jié)至580nm 處，然后在樣品池光路中放置一張白紙查看單色光的顏色，若不是橙黃色需調(diào)節(jié)波長(zhǎng)使白紙上的單色光成為橙黃色且邊緣清晰和無雜色。接著將波長(zhǎng)刻度盤的螺母擰松并旋轉(zhuǎn)至580nm。再使用濾光片或標(biāo)準(zhǔn)溶液檢定波長(zhǎng)誤差，為了進(jìn)一步縮小波長(zhǎng)誤差可再次擰松刻度盤螺母使刻度盤向相反方向旋轉(zhuǎn)相同誤差的刻度，直至調(diào)節(jié)到合格范圍之內(nèi)。非線性誤差。非線性誤差的特點(diǎn)是儀器三個(gè)波段的波長(zhǎng)誤差有正有負(fù)。調(diào)修時(shí)需首先將儀器中間波段的波長(zhǎng)利用上述方法調(diào)為準(zhǔn)確，然后根據(jù)偏移情況進(jìn)行調(diào)節(jié)：對(duì)于低端為正差和為負(fù)差的現(xiàn)象可順時(shí)針調(diào)節(jié)準(zhǔn)直螺母；對(duì)于低端為負(fù)差和為正差的現(xiàn)象可逆時(shí)針調(diào)節(jié)準(zhǔn)直螺母。

 雜散光超差的調(diào)修

由于紫外可見分光光度計(jì)的光源室需要散熱，灰塵容易通過散熱孔進(jìn)入儀器內(nèi)部，如果儀器內(nèi)部灰塵太多可用吹風(fēng)機(jī)和酒精進(jìn)行清理，特別注意清理反光鏡時(shí)需用火棉膠粘除，因?yàn)榉垂忡R表面為一層很軟的鍍膜很容易被擦花。光學(xué)元件位置發(fā)生變化也是雜散光超差的

主要原因，通常有以下幾種情況：光源燈與聚光鏡的位置發(fā)生變化導(dǎo)致聚焦不準(zhǔn)。將波長(zhǎng)調(diào)為580nm 查看光斑，如果光斑邊緣有光暈且光斑中央有雜色，說明是光源的聚焦不準(zhǔn)。這種情況可輕微移動(dòng)燈室和燈位置來調(diào)節(jié)聚光透鏡的焦距，同時(shí)觀察白紙上的光斑，當(dāng)焦距

對(duì)準(zhǔn)時(shí)光斑會(huì)突然變的純凈和均勻，然后再將燈室進(jìn)行固定。準(zhǔn)直鏡位置發(fā)生變化?，F(xiàn)象為雜散光超差，而580nm 波長(zhǎng)處的光斑無光暈和雜色。此時(shí)需要調(diào)節(jié)準(zhǔn)直鏡的調(diào)節(jié)螺母，每調(diào)節(jié)一次就檢定一次直至檢定合格。

透射比示值誤差超差的調(diào)修

因?yàn)橥干浔鹊臋z定是在特定波長(zhǎng)235nm、257nm、313nm、350nm、440nm、546nm 和635nm 處進(jìn)行檢定的，如果波長(zhǎng)的誤差超出規(guī)定范圍必定造成透射比的測(cè)量不準(zhǔn)，首先對(duì)波長(zhǎng)進(jìn)行檢定，檢定合格后方能進(jìn)行透射比檢定。比色皿架發(fā)生偏斜會(huì)造成光路穿過吸收池的光程發(fā)生變化使透射比示值誤差超差，因?yàn)槲舛?/span>A=-logT =kcl(k 為吸光系數(shù)，c 為溶液濃度，l 為光程)。此時(shí)，對(duì)比色皿的底座進(jìn)行調(diào)節(jié)使光束可以垂直從比色皿中央位置穿過。儀器使用時(shí)間太長(zhǎng)易發(fā)生光門密閉不嚴(yán)的現(xiàn)象，此時(shí)用手按壓光門可以發(fā)現(xiàn)透射比數(shù)值會(huì)發(fā)生較大的變化，對(duì)光門組件進(jìn)行維修后問題可以得到解決。zui后比色皿配套性超差是很容易被忽略的因素，比色皿經(jīng)常存在配套性差的問題，使用所有比色皿均應(yīng)進(jìn)行配套性檢定，配套性誤差小于0.5% 才能使用。

 基線平直度超差的調(diào)修

基線平直度超差的原因通常有：濾光片或其它光學(xué)元件被灰塵、水珠或者霉斑污染發(fā)生散射現(xiàn)象造成，對(duì)光學(xué)元件進(jìn)行清理后問題可以得到解決。濾光片安裝不牢固或者不正確，波長(zhǎng)調(diào)整時(shí)易產(chǎn)生較大噪聲，應(yīng)對(duì)濾光片的安裝進(jìn)行檢查。鎢燈與氘燈切換時(shí)基線發(fā)生較大的跳動(dòng)說明光源的切換存在問題，應(yīng)檢查光源的切換是否存在問題。儀器使用時(shí)間太長(zhǎng)光電轉(zhuǎn)換器和放大器易發(fā)生老化，更換后可以降低基線平直度誤差。電壓不穩(wěn)或電磁干擾也會(huì)對(duì)基線平直度造成較大的影響，電壓不穩(wěn)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)加裝穩(wěn)壓器。

 結(jié)束語(yǔ)

本文對(duì)波長(zhǎng)、雜散光、透射比和基線平直度造成的誤差進(jìn)行了分析，此外紫外- 可見分光光度計(jì)平時(shí)還要注意正確的使用、維護(hù)和保養(yǎng)。例如：使用完畢后要及時(shí)擦凈殘留的液體，并在樣品池放入變色硅膠，防止儀器的光學(xué)元件產(chǎn)生霉斑和水珠；使用完畢后應(yīng)使用防塵

套進(jìn)行遮罩，防止灰塵進(jìn)入儀器內(nèi)部污染光學(xué)元件；儀器應(yīng)盡量避免移動(dòng)，防止光學(xué)元件的位置發(fā)生變化。從而保證紫外- 可見分光光度計(jì)計(jì)量的準(zhǔn)確性，為檢測(cè)提供準(zhǔn)確和可靠的數(shù)據(jù)。